INFORMATIVOS
ORIENTAÇÃO PARA FIXAÇÃO DE AMOSTRAS TECIDUAIS

O fixador ideal é a formalina tamponada neutra à 10%.

O volume do fixador deve ser pelo menos 10 vezes o volume da amostra tecidual.

Soluções descalcificadoras com ácidos fortes não devem ser usadas.

Alguns anticorpos são muito sensíveis ao tempo de fixação pela formalina tamponada 10%, sendo recomendado o mínimo de 06 horas (dependendo do tamanho do espécime) e máximo de 72 horas (principalmente os anticorpos para alfa-inibina, CD10, CD45, CD31, Cox-2, CK7, CK20, Papilomavírus, Melan A, Cromogranina, Sinaptofisina).

As amostras tumorais sujeitas aos testes de imuno-histoquímica para marcadores HER2, RE e RP devem ser fixados em formalina tamponada à 10% por pelo menos 6 horas, com no máximo 48 horas para HER2 e 72 horas para RE/RP.

Os espécimes (amostra tecidual tumoral) devem ser imersos em fixadores dentro de no máximo 15 minutos após o procedimento de biópsia ou exérese cirúrgica.

A importância do Formol TAMPONADO 10% para a fixação da amostra tecidual.

Uma solução tampão é aquela que possui um pH constante. Para fixar amostras teciduais é necessário que o fixador tenha um pH semelhante ao do sangue. Isto evita que a uma solução ácida ou alcalina venha alterar os tecidos dos animais e prejudicar futuras análises diagnósticas ou prognósticas, especialmente em exames de imuno-histoquímica e de biologia molecular.

Outro fator importante é o período de fixação no FORMOL TAMPONADO a 10%, geralmente, um período de 24 a 72 horas é o ideal para que as reações de imuno-histoquímica e de biologia molecular apresentem bons resultados. 

Bibliografia.

Hewitt SM, et al. Quality Assurance for Design Control and Implementation of Immunohistochemistry Assays: Approved Guideline. 2nd ed. CLSI document I/ LA28-A2. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2011.

Ramos-Vara JA, Miller MA. When tissue antigens and antibodies get along: revisiting the technical aspects of immunohistochemistry-the red, brown, and blue technique. Vet Pathol. 2014; 51(1):42-87.

Ramos-Vara JA, et al. Immunohistochemical evaluation of the effects of paraffin section storage on biomarker stability. Vet Pathol. 2014; 51(1):102-9.

Webster JD, Miller MA, DuSold D, et al. Effects of prolonged formalin fixation on diagnostic immunohistochemistry in domestic animals. J Histochem Cytochem. 2009;57(8):753–761.