O fixador ideal é a formalina tamponada neutra à 10%.

O volume do fixador deve ser pelo menos 10 vezes o volume da amostra tecidual.

Soluções descalcificadoras com ácidos fortes não devem ser usadas.

Alguns anticorpos são muito sensíveis ao tempo de fixação pela formalina tamponada 10%, sendo recomendado o mínimo de 06 horas (dependendo do tamanho do espécime) e máximo de 72 horas (principalmente os anticorpos para alfa-inibina, CD10, CD45, CD31, Cox-2, CK7, CK20, Papilomavírus, Melan A, Cromogranina, Sinaptofisina).

As amostras tumorais sujeitas aos testes de imuno-histoquímica para marcadores HER2, RE e RP devem ser fixados em formalina tamponada à 10% por pelo menos 6 horas, com no máximo 48 horas para HER2 e 72 horas para RE/RP.

Os espécimes (amostra tecidual tumoral) devem ser imersos em fixadores dentro de no máximo 15 minutos após o procedimento de biópsia ou exérese cirúrgica.

A importância do Formol TAMPONADO 10% para a fixação da amostra tecidual.

Uma solução tampão é aquela que possui um pH constante. Para fixar amostras teciduais é necessário que o fixador tenha um pH semelhante ao do sangue. Isto evita que a uma solução ácida ou alcalina venha alterar os tecidos dos animais e prejudicar futuras análises diagnósticas ou prognósticas, especialmente em exames de imuno-histoquímica e de biologia molecular.

Outro fator importante é o período de fixação no FORMOL TAMPONADO a 10%, geralmente, um período de 24 a 72 horas é o ideal para que as reações de imuno-histoquímica e de biologia molecular apresentem bons resultados. 

Abaixo segue uma fórmula para o FORMOL TAMPONADO a 10%

Material necessário:
- formol 37% 
- água filtrada
- fosfato dibásico (anidro) de sódio
- fosfato monobásico de sódio monohidratado
- recipiente plástico (frasco resistente e bem vedado de boca larga, tipo coletor universal)

Receita de formol tamponado a 10%: 

*não é necessário utilizar água destilada.

Fixação:
- a fixação da amostra tecidual (peça cirúrgica) em formol 10% deve ser realizada logo após a biópsia ou procedimento cirúrgico;
- para a fixação adequada do material é necessário seguir a proporção de volume AMOSTRA/FIXADOR = 1:10

Bibliografia.

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Ramos-Vara JA, Miller MA. When tissue antigens and antibodies get along: revisiting the technical aspects of immunohistochemistry-the red, brown, and blue technique. Vet Pathol. 2014; 51(1):42-87.

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